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登録内容 (EID=121522)

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種別 (必須): 国内講演発表 [継承]
言語 (必須): 日本語 [継承]
招待 (推奨):
審査 (推奨):
カテゴリ (推奨): 研究 [継承]
共著種別 (推奨):
学究種別 (推奨):
組織 (推奨): 1.徳島大学.総合科学部.自然システム学科.生命科学講座 (〜2009年3月31日) [継承]
著者 (必須): 1.佐藤 高則
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2. (英) Maeda Ayumi (日) (読)
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3. (英) Tanaka Hiroshi (日) (読)
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4. (英) Sugiyama Noriko (日) (読)
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題名 (必須): (英) Thermus thermophilus Inorganic Pyrophosphatase mutants by error-prone PCR suppressed thermal aggregation.  (日) Error-prone PCRによるThermus thermophilus無機ピロリン酸加水分解酵素変異体の熱凝集抑制   [継承]
副題 (任意):
要約 (任意): (英) Thermus thermophilus Inorganic pyrophosphatase (Tth PPase) exh ibits high thermostability, but thermal aggregation was observed on heating above 85 . In addition, we reported that sole cysteine in C-terminal region plays a key role in the thermostability and thermal aggregation of Tth PPase. Therefore, we approached the suppression of its thermal aggre gation by error-prone PCR mutagenesis of whole molecule or C-terminal region .Firstly, we obtained thermostable four mutants (Q119H/L162F, L162F, K173E a nd K159E/A170T) by error-prone PCR mutagenesis. Moreover, we examined thermo stabilities of four mutants in terms of the enzyme activity, quaternary stru cture, and fluorescence spectra. Although conformation and quaternary struct ure of four mutants were almost the same as those of wild type enzyme in nat ive state, K173E and K159E/A170T mutants showed higher thermostabilities tha n wild type in quaternary structure and fluorescence spectra. In particular, thermal aggregation of these two mutants would be suppressed after heating at 85. Therefore, it was suggested that Lys residues in C-terminal region and molecular surface (K159 and K173) may contribute to the formation of thermal aggregation of Tth PPase.  (日)    [継承]
キーワード (推奨):
発行所 (推奨): 日本生化学会 [継承]
誌名 (必須): 生化学 ([日本生化学会])
(resolved by 0037-1017)
ISSN: 0037-1017 (pISSN: 0037-1017, eISSN: 2189-0544)
Title: Seikagaku. The Journal of Japanese Biochemical Society
Title(ISO): Seikagaku
Publisher: Nihon Seikagakkai/Japanese Biochemical Society
 (NLM Catalog  (医中誌Web  (Scopus (Scopus information is found. [need login])
(resolved by 2189-0544)
ISSN: 0037-1017 (pISSN: 0037-1017, eISSN: 2189-0544)
Title: Seikagaku. The Journal of Japanese Biochemical Society
Title(ISO): Seikagaku
Publisher: Nihon Seikagakkai/Japanese Biochemical Society
 (NLM Catalog  (医中誌Web  (Scopus (Scopus information is found. [need login])

ISSN (任意):
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(必須): 77 [継承]
(必須): 8 [継承]
(必須): 792 792 [継承]
都市 (必須): 神戸 (Kobe/[日本国]) [継承]
年月日 (必須): 西暦 2005年 10月 20日 (平成 17年 10月 20日) [継承]
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和文冊子 ● 佐藤 高則, Ayumi Maeda, Hiroshi Tanaka, Noriko Sugiyama : Error-prone PCRによるThermus thermophilus無機ピロリン酸加水分解酵素変異体の熱凝集抑制, 生化学, Vol.77, No.8, 792, 2005年10月.
欧文冊子 ● Takanori Satoh, Ayumi Maeda, Hiroshi Tanaka and Noriko Sugiyama : Thermus thermophilus Inorganic Pyrophosphatase mutants by error-prone PCR suppressed thermal aggregation., Seikagaku, Vol.77, No.8, 792, Oct. 2005.

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