徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

Education and Research Database (EDB), Tokushima University

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著作: [中村 教泰]/Tsumoto Kouhei/[石村 和敬]/Kumagai Izumi/Phage library panning against cytosolic fraction of cells using quantitative dot blotting assay: application of selected VH to histochemistry./[Journal of Immunological Methods]

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EID
98412
EOID
887732
Map
0
LastModified
2018年2月9日(金) 16:43:58
Operator
三木 ちひろ
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TRUE
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0
Owner
[副研究部長]/[徳島大学.大学院医歯薬学研究部]
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨
カテゴリ 推奨
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
著者 必須
  1. 中村 教泰
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. (英) Tsumoto Kouhei
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. 石村 和敬
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. (英) Kumagai Izumi
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Phage library panning against cytosolic fraction of cells using quantitative dot blotting assay: application of selected VH to histochemistry.

副題 任意
要約 任意

(英) Comprehensive preparations of antibodies against various kinds of proteins in cells would be useful in proteome research and antibody-based research. Here we report the panning of a human antibody heavy chain variable domain (VH) phage library against a cytosolic fraction of rat liver to obtain antibodies specific for certain cytoplasmic proteins. Rat liver specimens were homogenized and subjected to differential centrifugation. A 125000 x g supernatant (rat liver cytosol, RLC) was immobilized onto a nitrocellulose membrane and subjected to phage VH library panning. For efficient assessment of binding phages, we established a system that was a combination of monoclonal phage ELISA and quantitative dot blotting of phages. The VH genes of the binding phages were selected and expressed as VH--bacterial alkaline phosphatase (PhoA) conjugates (VH/RLC--PhoAs) in Escherichia coli. One of the VH/RLC--PhoAs stained one major band on Western blotting of RLC and also stained the cytoplasm of hepatocytes histochemically. This is the first report of phage library panning against the cytosolic fraction of cells to obtain human VH fragments, and the application of those human VH fragments to histochemical study.

キーワード 推奨
  1. (英) Amino Acid Sequence
  2. (英) Animals
  3. (英) Base Sequence
  4. (英) Blotting, Western
  5. (英) Cytosol
  6. DNA(DNA)
  7. (英) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
  8. (英) Humans
  9. (英) Immunoblotting
  10. (英) Immunoglobulin Heavy Chains
  11. (英) Immunoglobulin Variable Region
  12. (英) Liver
    データベース中に適合する可能性のある以下の情報を発見しました
    [キーワード] ドラッグデリバリーシステム (drug delivery system/->キーワード[薬物送達システム])
    [キーワード] 薬物送達システム (drug delivery system)
  13. (英) Male
    データベース中に適合する可能性のある以下の情報を発見しました
    [キーワード] 女性 (female)
    [キーワード] 男性 (male)
  14. (英) Peptide Library
  15. (英) Rats
  16. (英) Rats, Wistar
発行所 推奨
誌名 必須 Journal of Immunological Methods(Association of Medical Laboratory Immunologists)
(pISSN: 0022-1759, eISSN: 1872-7905)
ISSN 任意 0022-1759
ISSN: 0022-1759 (pISSN: 0022-1759, eISSN: 1872-7905)
Title: Journal of immunological methods
Title(ISO): J Immunol Methods
Publisher: Elsevier BV
 (NLM Catalog  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 261
必須 1-2
必須 65 72
都市 任意
年月日 必須 2002年 3月 1日
URL 任意
DOI 任意 10.1016/S0022-1759(01)00547-6    (→Scopusで検索)
PMID 任意 11861066    (→Scopusで検索)
NAID 任意
WOS 任意
Scopus 任意 2-s2.0-0036498673
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.Affiliation: Department of Anatomy and Cell Biology, School of Medicine, Tokushima University, 3-18-15 Kuramoto, Tokushima 770-8503, Japan.

  2. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article

  3. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Research Support, Non-U.S. Gov't