著作: Shimizu Atsushi/Sasaki Takashi/Kwon Jung-Hee/Odaka Akito/[佐藤 高則]/Sakurai Nobuhiko/Sakurai Takeshi/Yamaguchi Shotaro/Samejima Tatsuya/Site-Directed Mutagenesis of a Possible Type 1 Copper Ligand of Bilirubin Oxidase./[The Journal of Biochemistry]
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| 審査 | 推奨 | Peer Review | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| カテゴリ | 推奨 | 研究 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 共著種別 | 推奨 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 学究種別 | 推奨 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 組織 | 推奨 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 著者 | 必須 |
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| 題名 | 必須 |
(英) Site-Directed Mutagenesis of a Possible Type 1 Copper Ligand of Bilirubin Oxidase. |
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| 副題 | 任意 |
(英) A Met467Gln Mutant Shows Stellacyanin-Like Properties. |
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| 要約 | 任意 |
(英) In our previous paper, we reported a mutant of recombinant Myrothecium verrucaria bilirubin oxidase, in which the Met467 residue was replaced by Gly [Shimizu, A. et al. (1999) Biochemistry 38, 3034-3042]. This mutant displayed a remarkable reduction in enzymatic activity and an evident decrease in the intensity of the absorption band around 600 nm (type 1 charge transfer transition). In this study, we report the preparation of three Met467 mutants (Met467Gln, Met467His, and Met467Arg) and characterize their enzymatic activities, midpoint potentials, and absorption and ESR spectra. Met467His and Met467Arg show no enzymatic activity and a great reduction in the intensity of the absorption band around 600 nm. Furthermore, their ESR spectra show no type 1 copper signal, but only a type 2 copper signal; however, oxidation by ferricyanide caused the type 1 copper signal to appear. On the other hand, Met467Gln as expressed shows both type 1 and type 2 copper signals in its ESR spectrum, the type 1 copper atom parameters being very different from usual blue copper proteins but very similar to those of stellacyanin. The enzymatic activity of the Met467Gln mutant for bilirubin is quite low (0.3%), but the activity for potassium ferrocyanide is similar (130%) to that of the wild type enzyme. These results indicate that Met467 is important for characterizing the features of the type 1 copper of bilirubin oxidase. (日) Myrothecium verrucaria 由来Bilirubin OxidaseのType1銅原子リガンドと推定されるMet467をGln,HisおよびArgに置換した変異体を，ESRや吸収スペクトルにより分析した．その結果，HisおよびArg変異体の酵素活性は消失し，Type1銅に由来する吸収バンドが消失していた．また，Gln変異体は Stellacyaninに類似した挙動を示した． |
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| キーワード | 推奨 |
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| 発行所 | 推奨 | 日本生化学会 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 誌名 | 必須 |
The Journal of Biochemistry([日本生化学会])
(pISSN: 0021-924X, eISSN: 1756-2651)
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| 巻 | 必須 | 125 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 号 | 必須 | 4 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 頁 | 必須 | 662 668 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 都市 | 任意 | 東京(Tokyo/[日本国]) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 年月日 | 必須 | 1999年 4月 1日 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| URL | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| DOI | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| PMID | 任意 | 10101277 (→Scopusで検索) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| NAID | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| WOS | 任意 | 000079637000003 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Scopus | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 評価値 | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 被引用数 | 任意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 指導教員 | 推奨 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 備考 | 任意 |
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