徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

Education and Research Database (EDB), Tokushima University

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著作: Shimizu Atsushi/Sasaki Takashi/Kwon Jung-Hee/Odaka Akito/[佐藤 高則]/Sakurai Nobuhiko/Sakurai Takeshi/Yamaguchi Shotaro/Samejima Tatsuya/Site-Directed Mutagenesis of a Possible Type 1 Copper Ligand of Bilirubin Oxidase./[The Journal of Biochemistry]

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EID
65095
EOID
933810
Map
0
LastModified
2018年12月3日(月) 13:00:26
Operator
大家 隆弘
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TRUE
Censor
0
Owner
佐藤 高則
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨 Peer Review
カテゴリ 推奨 研究
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
  1. 青山学院大学.理工学部
  2. 金沢大学
  3. 天野製薬株式会社
著者 必須
  1. (英) Shimizu Atsushi
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. (英) Sasaki Takashi
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. (英) Kwon Jung-Hee
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. (英) Odaka Akito
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  5. 佐藤 高則
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  6. (英) Sakurai Nobuhiko
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  7. (英) Sakurai Takeshi
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  8. (英) Yamaguchi Shotaro
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  9. (英) Samejima Tatsuya
    役割 任意 共著
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Site-Directed Mutagenesis of a Possible Type 1 Copper Ligand of Bilirubin Oxidase.

副題 任意

(英) A Met467Gln Mutant Shows Stellacyanin-Like Properties.

要約 任意

(英) In our previous paper, we reported a mutant of recombinant Myrothecium verrucaria bilirubin oxidase, in which the Met467 residue was replaced by Gly [Shimizu, A. et al. (1999) Biochemistry 38, 3034-3042]. This mutant displayed a remarkable reduction in enzymatic activity and an evident decrease in the intensity of the absorption band around 600 nm (type 1 charge transfer transition). In this study, we report the preparation of three Met467 mutants (Met467Gln, Met467His, and Met467Arg) and characterize their enzymatic activities, midpoint potentials, and absorption and ESR spectra. Met467His and Met467Arg show no enzymatic activity and a great reduction in the intensity of the absorption band around 600 nm. Furthermore, their ESR spectra show no type 1 copper signal, but only a type 2 copper signal; however, oxidation by ferricyanide caused the type 1 copper signal to appear. On the other hand, Met467Gln as expressed shows both type 1 and type 2 copper signals in its ESR spectrum, the type 1 copper atom parameters being very different from usual blue copper proteins but very similar to those of stellacyanin. The enzymatic activity of the Met467Gln mutant for bilirubin is quite low (0.3%), but the activity for potassium ferrocyanide is similar (130%) to that of the wild type enzyme. These results indicate that Met467 is important for characterizing the features of the type 1 copper of bilirubin oxidase.

(日) Myrothecium verrucaria 由来Bilirubin OxidaseのType1銅原子リガンドと推定されるMet467をGln,HisおよびArgに置換した変異体を,ESRや吸収スペクトルにより分析した.その結果,HisおよびArg変異体の酵素活性は消失し,Type1銅に由来する吸収バンドが消失していた.また,Gln変異体は Stellacyaninに類似した挙動を示した.

キーワード 推奨
  1. (英) Amino Acid Sequence
  2. (英) Amino Acid Substitution
  3. (英) Aspergillus oryzae
  4. (英) Azurin
  5. (英) Base Sequence
  6. (英) Catalytic Domain
  7. (英) Copper
  8. (英) DNA Primers
  9. (英) Hypocreales
  10. (英) Ligands
  11. (英) Metalloproteins
  12. (英) Models, Molecular
  13. (英) Molecular Sequence Data
  14. (英) Mutagenesis, Site-Directed
  15. (英) Oxidoreductases
  16. (英) Oxidoreductases Acting on CH-CH Group Donors
  17. (英) Plant Proteins
  18. (英) Protein Conformation
  19. (英) Recombinant Proteins
  20. (英) Sequence Homology, Amino Acid
  21. (英) Spectrophotometry
発行所 推奨 日本生化学会
誌名 必須 The Journal of Biochemistry([日本生化学会])
(pISSN: 0021-924X, eISSN: 1756-2651)
ISSN 任意 0021-924X
ISSN: 0021-924X (pISSN: 0021-924X, eISSN: 1756-2651)
Title: Journal of biochemistry
Title(ISO): J Biochem
Supplier: Oxford University Press
Publisher: Oxford University Press
 (NLM Catalog  (医中誌Web  (J-STAGE  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 125
必須 4
必須 662 668
都市 任意 東京(Tokyo/[日本国])
年月日 必須 1999年 4月 1日
URL 任意
DOI 任意
PMID 任意 10101277    (→Scopusで検索)
NAID 任意
WOS 任意 000079637000003
Scopus 任意
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Comparative Study

  2. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article

  3. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Research Support, Non-U.S. Gov't