著作: Lin Qingyi/Le Quynh Anh/Takebayashi Koki/[ソンキテイデイロ チヨンマナート]/Wittayarat Manita/[平田 真樹]/[谷原 史倫]/[音井 威重]/Timing and duration of lipofection-mediated CRISPR/Cas9 delivery into porcine zygotes affect gene-editing events./[BMC Research Notes]
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| 言語 | 必須 | 英語 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 招待 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 審査 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| カテゴリ | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 共著種別 | 推奨 | 国際共著(徳島大学内研究者と国外研究機関所属研究者との共同研究) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 学究種別 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 組織 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 著者 | 必須 |
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| 題名 | 必須 |
(英) Timing and duration of lipofection-mediated CRISPR/Cas9 delivery into porcine zygotes affect gene-editing events. |
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| 副題 | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 要約 | 任意 |
(英) Lipofection-mediated introduction of the CRISPR/Cas9 system in porcine zygotes provides a simple method for gene editing, without requiring micromanipulation. However, the gene editing efficiency is inadequate. The aim of this study was to improve the lipofection-mediated gene editing efficiency by optimizing the timing and duration of lipofection. Zona pellucida (ZP)-free zygotes collected at 5, 10, and 15 h from the start of in vitro fertilization (IVF) were incubated with lipofection reagent, guide RNA (gRNA) targeting GGTA1, and Cas9 for 5 h. Lipofection of zygotes collected at 10 and 15 h from the start of IVF yielded mutant blastocysts. Next, ZP-free zygotes collected at 10 h from the start of IVF were incubated with lipofection reagent, gRNA, and Cas9 for 2.5, 5, 10, or 20 h. The blastocyst formation rate of zygotes treated for 20 h was significantly lower (p < 0.05) than those of the other groups, and no mutant blastocysts were obtained. Moreover, the mutation rates of the resulting blastocysts decreased as the incubation time increased. In conclusion, a lipofection-mediated gene editing system using the CRISPR/Cas9 system in ZP-zygotes is feasible; however, further improvements in the gene editing efficiency are required. |
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| キーワード | 推奨 |
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| 発行所 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 誌名 | 必須 |
BMC Research Notes([BioMed Central Ltd.])
(eISSN: 1756-0500)
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| 巻 | 必須 | 14 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 号 | 必須 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 頁 | 必須 | 389 389 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 都市 | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 年月日 | 必須 | 2021年 10月 9日 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| URL | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| DOI | 任意 | 10.1186/s13104-021-05800-8 (→Scopusで検索) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| PMID | 任意 | 34627381 (→Scopusで検索) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CRID | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Scopus | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| researchmap | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 評価値 | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 被引用数 | 任意 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 指導教員 | 推奨 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 備考 | 任意 |
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