徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

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著作: Yagi Hirokazu/Yanaka Saeko/Yogo Rina/Ikeda Akari/[鬼塚 正義]/Yamazaki Toshio/Kato Ttsuya/Park Y. Enoch/Yokoyama Jun/Kato Koichi/Silkworm pupae function as efficient producers of recombinant glycoproteins with stable-isotope labeling./[Biomolecules]

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EID
373149
EOID
999041
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0
LastModified
2021年1月25日(月) 20:24:04
Operator
大家 隆弘
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TRUE
Censor
0
Owner
鬼塚 正義
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨
カテゴリ 推奨 教育
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
著者 必須
  1. (英) Yagi Hirokazu
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. (英) Yanaka Saeko
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. (英) Yogo Rina
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. (英) Ikeda Akari
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  5. 鬼塚 正義([徳島大学.大学院社会産業理工学研究部.生物資源産業学域.応用生命系.生体分子機能学分野]/[徳島大学.生物資源産業学部.生物資源産業学科.応用生命講座])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  6. (英) Yamazaki Toshio
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  7. (英) Kato Ttsuya
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  8. (英) Park Y. Enoch
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  9. (英) Yokoyama Jun
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  10. (英) Kato Koichi
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Silkworm pupae function as efficient producers of recombinant glycoproteins with stable-isotope labeling.

副題 任意
要約 任意

(英) Baculovirus-infected silkworms are promising bioreactors for producing recombinant glycoproteins, including antibodies. Previously, we developed a method for isotope labeling of glycoproteins for nuclear magnetic resonance (NMR) studies using silkworm larvae reared on an artificial diet containing N-labeled yeast crude protein extract. Here, we further develop this method by introducing a technique for the expression of isotope-labeled glycoproteins by silkworm pupae, which has several potential advantages relative to larvae-based techniques in terms of production yield, ease of handling, and storage. Here, we fed fifth instar larvae an artificial diet with an optimized composition containing [methyl-C]methionine, leading to pupation. Nine-day-old pupae were then injected with recombinant nucleopolyhedrovirus (BmNPV) bacmid for expression of recombinant human immunoglobulin G (IgG). From the whole-body homogenates of pupae, 0.35 mg/pupa of IgG was harvested, which is a yield that is five times higher than can be obtained from larvae. Recombinant IgG, thus prepared, exhibited mainly three kinds of pauci-mannose-type oligosaccharides and had a C-enrichment ratio of approximately 80%. This enabled selective observation of NMR signals originating from the methionyl methyl group of IgG, confirming its conformational integrity. These data demonstrate the utility of silkworm pupae as factories for producing recombinant glycoproteins with amino-acid-selective isotope labeling.

キーワード 推奨
発行所 推奨
誌名 必須 Biomolecules(Molecular Diversity Preservation International)
(eISSN: 2218-273X)
ISSN 任意 2218-273X
ISSN: 2218-273X (eISSN: 2218-273X)
Title: Biomolecules
Title(ISO): Biomolecules
Publisher: Multidisciplinary Digital Publishing Institute (MDPI)
 (NLM Catalog  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 10
必須 11
必須 1482 1482
都市 任意
年月日 必須 2020年 10月 26日
URL 任意
DOI 任意 10.3390/biom10111482    (→Scopusで検索)
PMID 任意 33114581    (→Scopusで検索)
NAID 任意
WOS 任意
Scopus 任意 2-s2.0-85094185161
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.ELocationID: E1482

  2. (英) Article.ELocationID: 10.3390/biom10111482

  3. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article

  4. (英) KeywordList.Keyword: artificial diet

  5. (英) KeywordList.Keyword: immunoglobulin G

  6. (英) KeywordList.Keyword: isotope labeling

  7. (英) KeywordList.Keyword: recombinant glycoprotein

  8. (英) KeywordList.Keyword: silkworm pupa