徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

Education and Research Database (EDB), Tokushima University

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著作: [大島 敏久]/[川上 竜巳]/Kanai Yuichiro/[郷田 秀一郎]/[櫻庭 春彦]/Gene expression and characterization of 2-keto-3-deoxygluconate kinase, a key enzyme in the modified Entner-Doudoroff pathway of the aerobic and acidophilic hyperthermophile Sulfolobus tokodaii./[Protein Expression and Purification]

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EID
262446
EOID
688582
Map
0
LastModified
2013年5月28日(火) 14:54:18
Operator
三木 ちひろ
Avail
TRUE
Censor
0
Owner
川上 竜巳
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨
カテゴリ 推奨
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
著者 必須
  1. 大島 敏久([九州大学])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. 川上 竜巳([徳島大学.大学院社会産業理工学研究部.生物資源産業学域.食料科学系.食料科学分野]/[徳島大学.生物資源産業学部])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. (英) Kanai Yuichiro
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. 郷田 秀一郎([長崎大学])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  5. 櫻庭 春彦
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Gene expression and characterization of 2-keto-3-deoxygluconate kinase, a key enzyme in the modified Entner-Doudoroff pathway of the aerobic and acidophilic hyperthermophile Sulfolobus tokodaii.

副題 任意
要約 任意

(英) 2-Keto-3-deoxygluconate kinase (KDGK) catalyzes the ATP-dependent phosphorylation of 2-keto-3-deoxygluconate, a key intermediate in the modified (semi-phosphorylative) Entner-Doudoroff (ED) glucose metabolic pathway. We identified the gene (ORF ID: ST2478) encoding KDGK in the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus tokodaii based on the structure of a gene cluster in a genomic database and functionally expressed it in Escherichia coli. The expressed protein was purified from crude extract by heat treatment and two conventional column chromatography steps, and the partial amino acid sequence in the N-terminal region of the purified enzyme (MAKLIT) was identical to that obtained from the gene sequence. The purified enzyme was extremely thermostable and retained full activity after heating at 80 degrees C for 1 h. The enzyme utilized ATP or GTP, but not ADP or AMP, as a phosphoryl donor and 2-keto-3-deoxy-D-gluconate or 2-keto-D-gluconate as a phosphoryl acceptor. Divalent cations including Mg(2+), Co(2+), Ni(2+), Zn(2+) or Mn(2+) were required for activity, and the apparent Km values for KDG and ATP at 50 degrees C were 0.027 mM and 0.057 mM, respectively. The presence of KDGK means that the hyperthermophilic archaeon S. tokodaii metabolizes glucose via both modified (semi-phosphorylative) and non-phosphorylative ED pathways.

キーワード 推奨
  1. (英) Archaeal Proteins
  2. (英) Cations, Divalent
  3. (英) Cloning, Molecular
  4. 大腸菌(Escherichia coli)
  5. グルコース(glucose)
  6. (英) Hydrogen-Ion Concentration
  7. (英) Metals
  8. リン酸化(phosphorylation)
  9. (英) Phosphotransferases (Alcohol Group Acceptor)
  10. (英) Purine Nucleotides
  11. (英) Sulfolobus
発行所 推奨
誌名 必須 Protein Expression and Purification([Elsevier])
(pISSN: 1046-5928, eISSN: 1096-0279)
ISSN 任意 1046-5928
ISSN: 1046-5928 (pISSN: 1046-5928, eISSN: 1096-0279)
Title: Protein expression and purification
Title(ISO): Protein Expr Purif
Publisher: Elsevier Inc.
 (NLM Catalog  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 54
必須 1
必須 73 78
都市 任意
年月日 必須 2007年 2月 28日
URL 任意
DOI 任意 10.1016/j.pep.2007.02.013    (→Scopusで検索)
PMID 任意 17407821    (→Scopusで検索)
NAID 任意
WOS 任意
Scopus 任意
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.Affiliation: Microbial Genetics Division, Institute of Genetic Resources, Kyushu University, 6-10-1 Hakozaki Higashi-ku, Fukuoka 812-8581, Japan. ohshima@agr.kyushu-u.ac.jp

  2. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article

  3. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Research Support, Non-U.S. Gov't