徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

Education and Research Database (EDB), Tokushima University

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著作: [小杉 知里]/[李 雪飛]/[姚 陳娟]/[赤松 徹也]/[金森 憲雄]/[細井 和雄]/Protein kinase A-regulated membrane trafficking of a green fluorescent protein-aquaporin 5 chimera in MDCK cells/[Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research]

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EID
134066
EOID
663504
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0
LastModified
2012年10月4日(木) 18:17:12
Operator
大家 隆弘
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TRUE
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0
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細井 和雄
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨 Peer Review
カテゴリ 推奨
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
  1. 徳島大学.大学院ヘルスバイオサイエンス研究部.生体システム栄養科学部門.摂食機能制御学講座(2004年4月1日〜2015年3月31日)
著者 必須
  1. 小杉 知里
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. 李 雪飛
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. 姚 陳娟([徳島大学.大学院医歯薬学研究部.歯学域.口腔科学部門.基礎歯学系.口腔分子生理学])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. 赤松 徹也([徳島大学.大学院社会産業理工学研究部.生物資源産業学域.応用生命系.生体分子機能学分野]/[徳島大学.生物資源産業学部.生物資源産業学科.応用生命講座])
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  5. 金森 憲雄
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  6. 細井 和雄
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Protein kinase A-regulated membrane trafficking of a green fluorescent protein-aquaporin 5 chimera in MDCK cells

副題 任意
要約 任意

(英) The green fluorescent protein (GFP) of the jellyfish, Aeqorea victoria, was used as an autofluorescent tag to track the trafficking of aquaporin 5 (AQP5), an exocrine gland-type water channel. Two groups of chimeric proteins were constructed; one in which GFP was fused to the amino-terminus of AQP5 (GFP-AQP5) and the other, in which it was fused to the carboxyl terminus of it (AQP5-GFP). In each group, 2 chimeras were produced, a wild-type AQP5 with its normal sequence and a mutant AQP5 having a mutated amino acid at 259, i.e., GFP-AQP5-T259A and AQP5-GFP-T259A. They were used to transfect Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells. The GFP-AQP5 chimera was localized in the intracellular vesicles, which trafficked to the plasma membrane in response to N(6), 2'-O-dibutyryladenosine 3', 5'-cyclic monophosphate (dbcAMP). Membrane trafficking was inhibited by N-[2-(p-bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquimolinesulfonamide (H-89) but not by palmitoyl-dl-carnitine chloride (PCC). In contrast, the AQP5-GFP chimera expressed in MDCK cells was localized constitutively on the plasma membrane. The cellular localization of the latter chimera was not affected by stimulation with dbcAMP in the presence or absence of H-89 or PCC. Replacement of Thr-259 with Ala-259 did not affect the dbcAMP-induced translocation of the chimeric protein, suggesting that phosphorylation of Thr-259 was not necessary for AQP5 trafficking under the present experimental conditions. Thus, the GFP-AQP5 chimera will be a useful tool to study AQP5 trafficking in vitro, whereas the constitutive membrane localization of the AQP5-GFP chimera suggests the importance of the carboxyl terminus of the AQP5 protein for its sorting, whether it is translocated to intracellular vesicles or to the plasma membrane.

キーワード 推奨
  1. (英) Animals
  2. (英) Aquaporin 5
  3. (英) Cell Line
  4. (英) Cell Membrane
  5. (英) Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases
  6. (英) Dogs
  7. (英) Green Fluorescent Proteins
  8. (英) Protein Transport
  9. (英) Recombinant Fusion Proteins
発行所 推奨 Elsevier Science
誌名 必須 Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research([Elsevier Science])
(pISSN: 0167-4889)
ISSN 任意 0167-4889
ISSN: 0167-4889 (pISSN: 0167-4889, eISSN: 1879-2596)
Title: Biochimica et biophysica acta. Molecular cell research
Title(ISO): Biochim Biophys Acta Mol Cell Res
Publisher: Elsevier BV
 (NLM Catalog  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 1763
必須 4
必須 337 344
都市 任意
年月日 必須 2006年 4月 初日
URL 任意
DOI 任意 10.1016/j.bbamcr.2006.02.005    (→Scopusで検索)
PMID 任意 16603260    (→Scopusで検索)
NAID 任意
WOS 任意 000238347200001
Scopus 任意
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.Affiliation: Department of Molecular Oral Physiology, Institute of Health Biosciences, The University of Tokushima Graduate School, Tokushima-shi, Tokushima 770-8504, Japan.

  2. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article

  3. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Research Support, Non-U.S. Gov't