徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

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著作: [佐藤 高則]/Maeda Ayumi/Tanaka Hiroshi/Sugiyama Noriko/Error-prone PCRによるThermus thermophilus無機ピロリン酸加水分解酵素変異体の熱凝集抑制/[生化学]

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EID
121522
EOID
593279
Map
0
LastModified
2011年6月23日(木) 11:21:50
Operator
佐藤 高則
Avail
TRUE
Censor
0
Owner
佐藤 高則
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種別 必須 国内講演発表
言語 必須 日本語
招待 推奨
審査 推奨
カテゴリ 推奨 研究
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
  1. 徳島大学.総合科学部.自然システム学科.生命科学講座(〜2009年3月31日)
著者 必須
  1. 佐藤 高則
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. (英) Maeda Ayumi
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. (英) Tanaka Hiroshi
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. (英) Sugiyama Noriko
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) Thermus thermophilus Inorganic Pyrophosphatase mutants by error-prone PCR suppressed thermal aggregation.

(日) Error-prone PCRによるThermus thermophilus無機ピロリン酸加水分解酵素変異体の熱凝集抑制

副題 任意
要約 任意

(英) Thermus thermophilus Inorganic pyrophosphatase (Tth PPase) exh ibits high thermostability, but thermal aggregation was observed on heating above 85 . In addition, we reported that sole cysteine in C-terminal region plays a key role in the thermostability and thermal aggregation of Tth PPase. Therefore, we approached the suppression of its thermal aggre gation by error-prone PCR mutagenesis of whole molecule or C-terminal region .Firstly, we obtained thermostable four mutants (Q119H/L162F, L162F, K173E a nd K159E/A170T) by error-prone PCR mutagenesis. Moreover, we examined thermo stabilities of four mutants in terms of the enzyme activity, quaternary stru cture, and fluorescence spectra. Although conformation and quaternary struct ure of four mutants were almost the same as those of wild type enzyme in nat ive state, K173E and K159E/A170T mutants showed higher thermostabilities tha n wild type in quaternary structure and fluorescence spectra. In particular, thermal aggregation of these two mutants would be suppressed after heating at 85. Therefore, it was suggested that Lys residues in C-terminal region and molecular surface (K159 and K173) may contribute to the formation of thermal aggregation of Tth PPase.

キーワード 推奨
発行所 推奨 日本生化学会
誌名 必須 生化学([日本生化学会])
(resolved by 0037-1017)
ISSN: 0037-1017 (pISSN: 0037-1017, eISSN: 2189-0544)
Title: Seikagaku. The Journal of Japanese Biochemical Society
Title(ISO): Seikagaku
Publisher: Nihon Seikagakkai/Japanese Biochemical Society
 (NLM Catalog  (医中誌Web  (Scopus (Scopus information is found. [need login])
(resolved by 2189-0544)
ISSN: 0037-1017 (pISSN: 0037-1017, eISSN: 2189-0544)
Title: Seikagaku. The Journal of Japanese Biochemical Society
Title(ISO): Seikagaku
Publisher: Nihon Seikagakkai/Japanese Biochemical Society
 (NLM Catalog  (医中誌Web  (Scopus (Scopus information is found. [need login])
ISSN 任意
必須 77
必須 8
必須 792 792
都市 必須 神戸(Kobe/[日本国])
年月日 必須 2005年 10月 20日
URL 任意
DOI 任意
PMID 任意
NAID 任意
WOS 任意
Scopus 任意
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意