徳島大学 教育・研究者情報データベース(EDB)

Education and Research Database (EDB), Tokushima University

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著作: Yamamoto A/Araki T/Fujimori K/Yamada M/Yamaguchi H/Izumi K/[松本 耕三]/NaCl-aided hoechst 33258 staining method for DNA quantification and its application./[Histochemistry]

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EID
113666
EOID
611732
Map
0
LastModified
2011年9月5日(月) 14:38:44
Operator
大家 隆弘
Avail
TRUE
Censor
承認済
Owner
[学科長]/[徳島大学.医学部.医学科]
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種別 必須 学術論文(審査論文)
言語 必須 英語
招待 推奨
審査 推奨 Peer Review
カテゴリ 推奨
共著種別 推奨
学究種別 推奨
組織 推奨
  1. 徳島大学.医学部.附属動物実験施設(->組織[徳島大学.大学院ヘルスバイオサイエンス研究部.総合研究支援センター.動物資源研究部門])
著者 必須
  1. (英) Yamamoto A
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  2. (英) Araki T
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  3. (英) Fujimori K
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  4. (英) Yamada M
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  5. (英) Yamaguchi H
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  6. (英) Izumi K
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
  7. 松本 耕三
    役割 任意
    貢献度 任意
    学籍番号 推奨
題名 必須

(英) NaCl-aided hoechst 33258 staining method for DNA quantification and its application.

副題 任意
要約 任意

(英) We investigated the effect of salt on the fluorescence staining procedure for quantification of the amount of DNA in cell nuclei in situ. For this, NaCl was added at various concentrations to the Hoechst 33258 fluorochrome (Hoe) medium for staining DNA. The fluorescence intensity of free DNA-Hoe solution was not changed by the addition of NaCl, but that of the nuclei-Hoe complex in situ increased 4-fold on increasing the NaCl concentration up to 1 M. SDS polyacrylamide gel electrophoresis showed that histones H1, H2A, and H2B dissociated from cell nuclei in the presence of 1 M NaCl, resulting in increasing accessibility of DNA to the fluorochrome. The applicability of the NaCl-aided fluorescence staining method was evaluated by measuring the ploidy classes of various cells. The amount of DNA in spermatozoa is half that in 2 n hepatocytes, but by the conventional Hoe staining procedure the fluorescence intensity of spermatozoa is higher than that of 2 n hepatocytes, due to differences in accessibility of the dye to DNA. In contrast, by the NaCl-aided procedure, the fluorescence intensity of 2 n hepatocytes was twice that of spermatozoa. The effectiveness of the NaCl-aided Hoe staining method was checked using cultivated human gingival cells and hepatocytes of LEC rats with hereditary hepatitis. In all cases, reasonable proportionality between the fluorescence intensity and the amount of DNA was observed.

キーワード 推奨
  1. (英) Animals
  2. (英) Benzimidazoles
  3. (英) Bisbenzimidazole
  4. (英) Cell Nucleus
  5. (英) Cells, Cultured
  6. (英) DNA
  7. (英) Fluorometry
  8. (英) Gingiva
  9. (英) Humans
  10. (英) Liver
  11. (英) Male
  12. (英) Rats
  13. (英) Sodium Chloride
  14. (英) Spermatozoa
  15. (英) Swine
発行所 推奨
誌名 必須 Histochemistry([Springer-Verlag])
(pISSN: 0301-5564)
ISSN 任意 0301-5564
ISSN: 0301-5564 (pISSN: 0301-5564)
Title: Histochemistry
Title(ISO): Histochemistry
Publisher: Springer Verlag
 (NLM Catalog  (Scopus  (CrossRef (Scopus information is found. [need login])
必須 92
必須 1
必須 65 68
都市 任意
年月日 必須 1989年 0月 初日
URL 任意
DOI 任意
PMID 任意 2475469    (→Scopusで検索)
CRID 任意
WOS 任意
Scopus 任意
評価値 任意
被引用数 任意
指導教員 推奨
備考 任意
  1. (英) Article.Affiliation: Department of Anatomy, University of Tokushima, Japan.

  2. (英) Article.PublicationTypeList.PublicationType: Journal Article